В документированной процедуре изложены правила сбора и транспортирования биологических материалов в лабораторию клинической микробиологии (бактериологии) ГОБУЗ “Мурманская областная клиническая больница им. П. А. Баяндина” в целях повышения качества результатов лабораторных исследований и организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также профилактики внутрибольничных инфекций у медицинского персонала и пациентов.
Документированная процедура предназначены для использования в МОКБ, а также может использоваться организациями, направляющими заказ на услугу по лабораторной диагностике.
Общие положения
Предложенная техника сбора и транспортирования биологических материалов в ЛКМ МОКБ позволит снизить уровень преаналитической ошибки и повысить качество работы лаборатории по объективизации результатов.
Документированная процедура определяет правила предохранения медицинского персонала и пациентов от инфицирования при сборе и доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут быть обсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.
Общие требования к сбору проб биоматериала для микробиологического исследования
Материал для исследования собирают в достаточном количестве.
Материал должен соответствовать характеру инфекционного процесса.
При сборе материала необходимо использовать только стерильные инструменты и посуду, соблюдая правила асептики для исключения контаминации (загрязнения) биопробы нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов.
При сборе биоматериала медперсонал обязан использовать средства индивидуальной защиты (далее — СИЗ) (перчатки, маска, шапочка, очки и др.).
Необходимо осуществлять сбор биоматериала только в рекомендуемые транспортные среды и контейнеры.
Материал для исследования, по возможности, собирают до начала антибактериальной терапии. При отсутствии такой возможности собирают, непосредственно, перед повторным введением (приемом) препаратов.
В бланке направления на исследование в обязательном порядке указывают наименование принимаемых антибактериальных препаратов.
Не допускается загрязнение наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб.
Не допускается загрязнение сопроводительных документов (направлений).
При сборе биоматериала в пробирки, необходимо использовать штативы.
После взятия биоматериала, необходимо сделать запись о процедуре в бланке направления: дату, время взятия, другую информацию.
Правила маркировки проб биоматериала для микробиологического исследования
Все биопробы, поступающие в лабораторию должны пройти процедуру штрих-кодирования.
Наклейки, с нанесенными штрих-кодами, получают в централизованной многофункциональной лаборатории (далее ЦМЛ) МОКБ.
Цель штрих-кодирования — идентификация пациента (на пробирке (контейнере, флаконе) и на бланке должен быть одинаковый номер штрих-кода).
Штрих-код наклеивают на пробирку (контейнер, флакон) строго вертикально цифровой надписью сверху вниз, на имеющуюся наклейку. Необходимо оставить прозрачную зону для контроля состояния биопробы. Штрих-коды, наклеенные неровно, не будут считываться сканерами приборов.
Штрих-код должен быть наклеен ровно и плотно, строго вертикально (длинной стороной вдоль пробирки, контейнера) (рисунок 2).
При маркировке контейнера штрих-код наклеивается непосредственно на сам контейнер, на крышку маркировка не наносится.
Рекомендуется двойная маркировка — помимо штрих-кодирования, на емкость для сбора наносится краткая запись (номер, фамилия, уточнение локализации биоматериала и др.).
Выбор лент со штрих-кодами определяется количеством пробирок, контейнеров для исследований одного пациента, с учетом штрих-кодирования бланка направления (не менее 2-х штрих кодов на ленте: 1-й-на пробирку, 2-й на бланк).
Весь биоматериал маркируется двойными штрих-кодами.
Исключение для исследования:
(63037) «Микробиологическое исследование крови и других стерильных в норме жидкостей на микрофлору»
Необходимо использовать тройной штрих-код:
1 – направление-бланк на исследование
2 – аэробный флакон
3 – анаэробный флакон
Общие требования к условиям хранения проб биоматериала до доставки в лабораторию
Соблюдайте условия хранения биопроб до доставки в лабораторию (таблица 1).
Рекомендуется организовать в отделениях медицинской организации место хранения биопроб до их отправки в лабораторию (таблица 2).
Место хранения биопроб должно иметь маркировку знаком «Биологическая опасность».
Биопробы необходимо хранить в закрывающихся контейнерах, имеющих маркировку знаком «Биологическая опасность».
Регулярно проводите дез.обработку места хранения биопроб, контейнеров.
Сопроводительные документы (бланки направлений на исследования) помещают в пластиковый пакет (файл) для исключения контакта с биоматериалом.
Таблица 1
Общая характеристика
Культуральное исследование крови необходимо проводить всем тяжелобольным с лихорадкой, ознобом, в случае подозрения на эндокардит, внутрисосудистую инфекцию или иммуносупрессию. Причиной сепсиса или бактериемии, особенно у ослабленных больных, могут быть любые микроорганизмы, включая условно-патогенные и даже сапрофитные виды. Если обнаружение в крови патогенных микроорганизмов практически всегда свидетельствует об их этиологической значимости, то находки условно-патогенных и сапрофитных видов могут быть следствием контаминации крови в процессе ее взятия или случайного загрязнения посевов при дальнейшей работе с ними. Микроорганизмы, которые выделяются: Аэробы: стрептококки, стафилококки, энтеробактерии, неферментирующие, энтерококки.
Кому необходимо пройти анализ?
Снижение иммунитета и лихорадка могут свидетельствовать о развитии инфекционной болезни. Поэтому люди, которые чувствуют резкий упадок сил, сопровождающийся постоянными скачками температуры, должны пройти анализ на стерильность.
Тестирование необходимо в некоторых конкретных случаях:
- плохое самочувствие пациента;
- снижение иммунитета;
- подозрение на туберкулез;
- подозрение на сепсис или менингит;
- стабильно высокая температура тела;
- неэффективное лечение антибиотиками;
- пациент является донором крови.
Неэффективное лечение антибиотиками чаще всего указывает на то, что вы лечитесь от неправильно поставленного диагноза. Для того, чтобы не травмировать организм медикаментами, которые ему никак не помогут, необходимо сдать кровь на стерильность. Вполне возможно, что у вас несколько видов бактерий, и антибиотик убивает только один из них. В этом случае необходимо комплексное лечение.
Если человек является донором, то ему обязательно нужно пройти данный анализ, чтоб не заразить реципиента. Инфекции, которые передаются через кровь – очень стойкие, поэтому вероятность того, что при переливании они передаются – очень высока.
Показания для назначения
1. Cостояния и инфекционные (бактериального происхождения) заболевания, сопровождающиеся многократными подъемами температуры, когда возбудитель циркулирует в крови. 2. Пациенты после хирургических вмешательств, с патологией сердечно-сосудистой системы, имеющие сосудистые катетеры, искусственные клапаны сердца и кардиостимуляторы.3. Бактериемия при инфекционных эндокардитах, остеомиелитах, артритах, менингитах, пневмониях, интраабдоминальных инфекциях, инфекциях кожи, мягких тканей и мочевыводящих путей.
Как подготовиться к анализу?
Процедура проводится в лабораторных условиях. Медики, посредством посева крови на определенную среду, могут увидеть, есть ли у вас в организме бактерии, и насколько быстро они размножаются. Также определяются виды бактерий. Для того, чтобы сдать кровь на стерильность, необходимо придерживаться всего нескольких правил. Во-первых, не пить алкоголь и не есть жирную пищу. Во-вторых, не курить. Данные рекомендации необходимо соблюдать хотя бы за несколько дней до процедуры. От курения стоит отказаться за несколько часов до сдачи анализа крови.
Также пациентам следует воздержаться от приема пищи хотя бы за восемь часов до процедуры. Кровь сдают с утра на голодный желудок, так как это значительно увеличивает шансы достоверности результатов тестирования. Анализы будут готовы в течение примерно недели (для доноров срок проверки может быть дольше).
Интерпретация:
- 1. При случайной контаминации крови чаще всего выделяются микроорганизмы, входящие в состав нормальной микрофлоры кожи или широко распространенные в окружающей среде: Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp., Bacillus spp. и др. Причиной сепсиса они бывают, как правило, только у больных со сниженной резистентностью.2. Одновременное выделение из крови нескольких видов микроорганизмов чаще всего свидетельствует о случайном загрязнении крови, но у больных со сниженной резистентностью возможна смешанная инфекция.3. На этиологическую значимость микроорганизма указывает• его неоднократное выделение из крови или одновременное выделение из крови и других видов исследуемого материала;• быстрое, в течение 48 часов обнаружение микроорганизма. Приблизительно 65% посевов крови от больных с бактериемией дают положительный результат в первые 24 ч культивирования, а 90% в течение 3 сут.
Образец результата (PDF)
Рекомендации по организации места хранения биопроб до доставки в лабораторию
| Температурный режим хранения, и др. | Место хранения биопроб |
|
при комнатной температуре
(18—20°С), в тёмном месте |
Закрытый «холодный» шкаф, тумбочка вдали от отопительных приборов |
| В закрытом контейнере для доставки | |
| при температуре 2-80С | В холодильнике |
| В термоконтейнере с хладоэлементами | |
| при температуре 370С | Термостат |
| В контейнере с термоэлементами, нагретыми до необходимой температуры (грелка, обернуть одноразовой пеленкой, ветошью) |
Общие требования к доставке проб биоматериала для микробиологического исследования
Доставка проб биоматериала осуществляется в рабочие дни и время ЛКМ (бактериологии), согласно режиму доставки в ЛКМ.
Исключение составляет круглосуточный прием от отделений МОКБ следующих биоматериалов:
Пробы ликвора — для проведения реакции латекс-агглютинации и бактериологического посева.
Пробы крови — для посева на стерильность.
Собранный материал доставляют в лабораторию в рекомендуемые сроки (таблица 1).
Доставка биоматериала осуществляется курьером.
Не допускается доставка биоматериала пациентами.
Для доставки биоматериала необходимо использовать закрывающиеся контейнеры, биксы или сумки-холодильники, обязательна маркировка знаком «Биологическая опасность».
Не допускается доставка биоматериала в руках, карманах, хозяйственных сумках и других предметах личного пользования.
Дно контейнеров должно быть покрыто сухим адсорбирующим материалом (марлевая салфетка, ткань, вата и пр.).
Доставляемые емкости с биоматериалами должны быть закрыты пробками, крышками, исключающими выливание содержимого во время транспортирования.
Доставка жидкого биоматериала осуществляется строго в вертикальном положении, в штативах.
Сопроводительные документы (бланки направлений на исследования) помещают в непромокаемый пакет (файл, папка) для исключения контакта с биоматериалом.
Разбор доставленного биоматериала должен проводиться с соблюдением мер предосторожности. Емкости с биоматериалами должны помещаться на поднос или лоток. Персонал должен использовать средства индивидуальной защиты (резиновые перчатки, маску).
Таблица 1
1.4. Наложение жгута и выбор места пункции
Продезинфицируйте место пункции согласно действующему порядку гигиены
Наложите жгут на ширину ладони выше места пункции
Пульс должен прощупываться (давление жгута 50-100 мм рт ст) Максимальная продолжительность наложения жгута- 1 минута
Сравнение результатов при увеличении времени наложения жгута от 2 до 6 минут
Места пункций
- Vena basilica
- Vena mediana cubiti (имеется в виду более глубоко расположенная вена, которая не просвечивается голубым цветом и просматривается только как выбухание)
- Vena cephalica (проходит со стороны большого пальца кисти)
- Vena cephalica
- Vena basilica
- Rete venosum dorsale manus
Время наложения жгута
Время наложения жгута более 1 минуты может вызвать изменение концентрации веществ и результатов измерений.
Для высокомолекулярных веществ (например, общий белок), а также для связанного с белком кальция могут быть получены искаженно высокие результаты измерений (особенно это касается измеряемых величин с относительно узкими референсными интервалами).
Показатели калия могут снижаться при увеличении времени наложения жгута.
Расшифровка результатов
Уровень стерильности крови, составляющий менее 100%, может означать наличие бактериемии. Чем больше обнаруживается патогенных бактерий, тем обширнее их активность во всем организме. При этом они обнаруживаются и в таких биологических материалах, как моча, мокрота.
Наибольшая точность получается при параллельном культивировании микроорганизмов в разных субстратах.
Бак-посев может определять как тип болезнетворного возбудителя, так и стадию поражения организма инфекцией:
- Первая стадия инфицирования показывает, что в плотном субстрате бактерии отсутствуют, а в жидкой наблюдается их минимальное количество.
- Вторая определяется, если в плотном субстрате лаборантом выявлено 5-8 колоний.
- Третья обусловлена наличием бактерий в плотном субстрате в объеме до 100 колоний.
- Соответствующим показателем для постановки четвертой стадии будет обнаружение колоний в количестве, превышающем 100 штук.
1.3. Получение исследуемого материала: 12 шагов
| 1. Продезинфицируйте руки! Наденьте перчатки! | 7. Поверните иглу срезом в сторону, противоположную поверхности кожи! |
| 2. Наложите венозный жгут. | 8. Угол прокола должен быть менее 30 град. |
| 3. Оцените состояние вен и сделайте выбор. | 9. Зафиксируйте вену, натянув кожу! |
| 4. Продезинфицируйте место пункции! | 10. По возможности предупредите пациента о начале процедуры. |
| 5. Не дотрагивайтесь больше до места пункции! | 11. Как только кровь начнет поступать в пробирку, ослабьте жгут! |
| 6. Снимите с иглы защитный колпачок! | 12. Выполните взятие проб, соблюдайте последовательность действий! |
1.7. Взятие проб крови из катетеров
Следует избегать взятия крови из катетеров ввиду возможного искажения данных измерения. Возможными рисками здесь являются гемолиз и бактериальное загрязнение из-за инфузий. В тех случаях, когда взятие крови из катетера неизбежно, необходимо учитывать следующее:
— Во избежание эффектов разбавления или бактериального загрязнения между последней инфузией и взятием крови должно пройти не менее 15 минут. Выбор времени зависит от инфузии и должен соответствовать правилам внутреннего распорядка лечебного учреждения.
| Инфузия | Минимальный промежуток времени (в часах) до взятия крови после окончания инфузии |
| Жировая эмульсия | 8 |
| Раствор с большим содержанием углеводов | 1 |
| Аминокислоты, гидролизаты протеина | 1 |
| Электролиты | 1 |
— Если катетер промывался гепаринсодержащим раствором, то перед взятием крови для анализов на свертываемость его следует промыть раствором хлористого натрия.
— Перед взятием пробы крови 5-10 мл крови следует слить в отдельную пробирку и не использовать. Во избежание путаницы эту пробирку следует соответствующим образом промаркировать.
Принципиально можно упростить затруднения при интерпретации сомнительных результатов анализов, если сообщить в лабораторию о том, что данная проба была взята из катетера. Для контроля медикаментозного лечения следует особо обращать внимание на риск бактериального загрязнения. Попадание остатков медикаментов может приводить к слишком большим искажениям результатов измерения.
Фактор риска гемолиза : катетеры
При взятии крови из катетеров не рекомендуется использовать вакуумную технику из-за высокой скорости тока крови, из-за чего возникает высокий риск гемолиза.
С помощью аспирационной техники возможно щадящее, медленное заполнение S-Monovette. Благодаря этому риск гемолиза существенно уменьшается.
Переходник Multi-Adapter: прямое соединение
S-Monovette можно напрямую соединить с катетером с помощью переходника Multi-Adapter.
Можно предотвратить использование одноразовых шприцев и, соответственно, риск появления гемолиза и перекрестного бактериального загрязнения.
— Для соединения S-Monovette с переходниками типа Луер используйте, например, in vitro катетор или трехходовой кран.
1.5. Проблемы до и во время взятия крови
Плохое состояние вен
— Выберете другое место пункции.
— Наложите термосалфетку или теплую ткань.
— Используйте безопасный комплект Multifly.
— Примените взятие крови по аспирационному методу.
«Работа кулаком», вызывающая увеличение тока крови, из-за мышечной активности ведет к повышению уровня К и Mg.
— Слишком продолжительное сжатие вены ведет к изменению ряда параметров, например, К,ГГТ.
— «Изгибание» безопасной иглы при использовании S-Monovette не требуется, так как стандартный прокол выполняется под очень малым углом. Изменение просвета в результате изгибания иглы может привести к повреждению клеток (гемолиз).
— Слишком тонкая игла также может вызвать гемолиз.
Срез иглы прилегает к стенке вены
Решение: Слегка отведите иглу назад до восстановления кровотока
Игла проколола вену
Решение: Слегка отведите вену назад до восстановления кровотока.
Спались стенки вены
Решение: Подождите, пока вена не вернется в исходное состояние, а затем осторожно произведите взятие крови.
1.6. Аспирационная техника и вакуумная техника
1.6.1. S-Monovette – аспирационная техника
Внимание! — Только непосредственно перед пункцией вены следует зафиксировать иглу S-Monovette легким поворотом по часовой стрелке.
— Большим пальцем свободной руки натяните кожу и зафиксируйте вену. Предупредите пациента о начале процедуры и введите иглу в вену. Как только вена будет пунктирована, в S-Monovette поступит первая капля крови, что свидетельствует о попадании в вену.
— Ослабьте жгут и медленно оттяните поршень. Подождите, пока кровь не перестанет поступать в пробирку.
— При взятии нескольких проб следует отсоединить первую пробирку S-Monovette от иглы легким поворотом против часовой стрелки. При этом игла остается в вене.
После взятия крови
— Сначала отсоедините S-Monovette, а затем извлеките иглу из вены.
Внимание! После завершения процедуры взятия крови (это касается всех устройств S-Monovette) оттяните шток поршня до характерного щелчка и отломите рукоятку.
1.6.2. S-Monovette – вакуумная техника
— Перед взятием крови безопасная игла уже должна находиться в вене.
— Мы настоятельно рекомендуем использовать первую пробирку S-Monovette с помощью аспирационной техники, чтобы можно было начинать взятие крови в щадящем режиме. Затем можно переходить к вакуумной технике.
— Непосредственно перед взятием крови следует оттянуть поршень до дна пробирки S-Monovette до характерного щелчка. Отломить рукоятку (раздается хруст).
— Подсоедините пробирку S-Monovette с созданным вакуумом к игле и зафиксируйте ее путем вращением по часовой стрелке.
— Подождите пока кровь не перестанет поступать в пробирку, затем отсоедините S-Monovette от безопасной иглы, потом извлеките безопасную иглу из вены.
Аспирационная техника
Вакуумная техника
Через сколько времени готов результат
Примерно через 3 дня исследуемый человек может узнать о стерильности своей крови. Уже через несколько суток врачи могут сказать о наличии бактерий и их примерном количестве.
Точный окончательный результат готов примерно через 10 дней. За это время специалисты «выращивают» инфекционных возбудителей в специальных чашках. Также в течение этого срока изучается устойчивость бактерий и грибков к различным антибиотикам.
